martes, 26 de junio de 2012

frotis sanguineo

FROTIS SANGUINEO

 Un frotis de sangre es un mecanismo científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente.

Es más adecuado emplear sangre que aún no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre).

Su arquitectura de las células al formarse en la médula ósea.

1.  Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifica de algunas enfermedades.

2.  Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia.

3.  La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre.

La fidelidad de la información obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las extensiones. Estas no deben ser demasiado gruesas porque las células se amontonarían y no podrían ser reconocidas, ni diferenciarse, ni demasiado delgadas porque las células se deformarían, distorsionarían y destruirían. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:

1.  Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (prefentemente nuevos).

2.  La gota de sangre usada para la preparación de el frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia de el tamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.

3.  La sangre no haya estado en contacto con anticoagulante, pues podría deformarse la morfología celular si pasase esto.

4.  La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".





COMO SE REALIZA UN FROTIS SANGUINEO



Para llevar a cabo las extensiones en portaobjeto se coloca una gota de sangre de 3 a 4 mm de diámetro, a unos 2 o 3 cm de uno de los extremos de el portaobjetos este se coloca en una superficie plana y lisa. Con el borde de otro portaobjeto, con el que se toca la gota de sangre, la cual se desliza por capilaridad a todo lo largo de el canto de dicho portaobjeto y con un movimiento rápido y uniforme, en un angulo de 45 grados se desliza el portaobjetos dejando una capa de sangre en la superficie de el otro. El espesor del extendido debe ser delgado.

COLORANTE DE WRIGHT



Definición      
Set de tinción de Wright.
Descripción
Colorante Wright para tinción de Frotis sanguíneo o médula ósea de gran importancia en Hematología, ya que el diagnóstico de muchas enfermedades hematológicas puede realizarse con sólo observar las características morfológicas de las células sanguíneas.
Romanowsky (Wrigth, Giemsa, Leishman, May Grünwald) son mezclas de 2 colorantes primarios, el Azul de metileno y la eosina. El azul de metileno (color azul), es un colorante básico, en las células se une a sustancias ácidas que se tiñen de color azul. La eosina es un colorante ácido, en las células se unen a las proteínas básicas que se observan de color naranja, Durante el proceso de maduración de los colorantes de Romanowsky, el azul de metileno se oxida dando lugar a colorantes secundarios. Los más importantes son los Azures de metileno, de color azul brillante, que son también colorantes metacromáticos. Cuando las moléculas de un colorante metacromático estan desordenados en una solución, el color observado es el natural (azul), sin embargo, cuando dichas moléculas se ordenan en el espacio muy juntas unas de otras forman un color distinto (Rojo).    
Aplicaciones
Proporcionar a los Laboratorios de la Caja Costarricense de Seguro Social un set de colorante para hematología de una excelente calidad que permita obtener resultados confiables. Se recomienda su uso para tinción de extendidos de sangre periférica, medula ósea entre otros.
Presentación
En envases plásticos ámbar de un litro conteniendo colorante de Wright y el Buffer pH 6.8 en otro envase de 1 litro, con tapa y en bolsa plástica Termoencogible selladas con calor, envases debidamente etiquetados con la siguiente información: nombre del producto, número de lote, fecha de fabricación y de vencimiento y número de teléfono del laboratorio.
Empaque secundario en cajas de cartón con 6 Set tinción de Wright con la siguiente información impresa: nombre del producto, código (2-88-44-0220), fecha de fabricación y de vencimiento, número de lote, nombre y número de teléfono del laboratorio.
Vida Útil
El producto mantendrá sus características por lo menos durante 24 meses después de la fecha de fabricación, siempre y cuando no se rompa el sello de seguridad.
Almacenamiento
El producto debe mantenerse a temperatura ambiente. El área de almacenamiento debe ser un área completamente limpio, fresco, seco, sin humedad y a una temperatura menor de 30°, que no tenga contacto con productos químicos y protegido de la luz solar. Así su transporte debe ser realizado a temperatura ambiente, en un camión adecuado, limpio, protegido de la lluvia y libre de humedad.
Indicaciones de Uso
  • Cubrir toda la superficie de la extensión con Wright.
  • Esperar 2 -3 minutos (el tiempo óptimo es determinado por ensayo). Agregar solución buffer suficiente para cubrir la lámina.
  • Soplar suavemente el extendido para mezclar hasta obtener una película uniforme de apariencia metálica - verdosa.
  • Esperar 8 - 7 minutos. 
Información de Seguridad
Revise la fecha de vencimiento en el envase.  
Control de Calidad
Se realiza control de calidad interno y control de calidad externo por lote, los que deben cumplir para ser despachados por el DALDI.









TINSION DE HEMOGRAMAS    



n  El hemograma es la lectura de un frotis de sangre; dando una apreciación:

n  Semicualitativa (recuento) de los elementos figurados (eritrocitos, leucocitos, plaquetas).

n  Porcentual de leucocitos.

Cualitativa (Morfología) de los elementos figurados

Datos entregados  por el hemograma:



n  El hematocrito (Hto).

n  Concentración de hemoglobina (Hb).

n  Hemoglobina Corpuscular media (H.C.M.).

n  Concentración de la HCM (C.H.C.M.).

n  Volumen Corpuscular medio (V.C.M.).

n  Recuento de eritrocitos.

n  Recuento de leucocitos.

n  Recuento de plaquetas.

n  Además nos entrega la dispersión del tamaño de los eritrocitos (RDW), lo que representa el coeficiente de variación de tamaño de los eritrocitos.



Hemograma normal

n  Traduce la normalidad anatomofisiológica de los centros hematopoyéticos y el equilibrio entre la producción y destrucción de los elementos figurados de la sangre.

n  Su alteración es la expresión de cambios fisiológicos o patológicos en el organismo.

Formula del hemograma normal:

n  Hematocrito                          H:47%       M:42%

n  Hemoglobina                        H:16g%     M:14 g%

n  Eritrocitos                              H:5x106     M: 4,5x106

n  Leucocitos                            H y M: 5.000-10.000

Plaquetas                                       H y M:150.000-300.000                                           

Hematocrito y hemoglobina



n  Sus valores se relacionan al número y cantidad de Hb de los eritrocitos.

n  Cuando estos valores se encuentran disminuidos en más de 2 DS respecto al promedio, según la edad, se habla de Anemia.

n  Si están significativamente aumentados, se habla de Policitemia.



Alteraciones en la morfología  de los  eritrocitos

n  Del tamaño:

n  Anisocitosis                 Diferentes tamaños.

n  Microcitosis                 Menor tamaño.

n  Macrocitosis                Mayor tamaño.

n  Megalocitosis              Grandes y ovalados.

n  De la coloración:

n  Hipocromía                 C.H.C.M. disminuida ¯ 30%

n  Hipercromía                Esferocito,Hb concentrada

De la forma:

n  Poiquilocitosis             Distintas formas

n  Ovalocitosis                Forma ovalada 

n  Eliptocitosis                 Forma elíptica

n  Esferocitosis               Forma esférica

n  Esquizocitosis             Fragmentos de G.R.



FORMULA LEUCOSITARIA NORMAL

n  Eosinófilos                                             1-3

n  Basófilos                                                          0-1

n  Baciliformes                                           0-4

n  Neutrófilos                                             60-70

n  Linfocitos                                                         20-45

n  Monocitos                                                        3-7

n  Número de leucocitos       5.000-10000 x mm3

ALTERACIONES DE  N° DE LEUCOSITOS

Leucocitosis                                   Aumento del nº de leucocitos.

n  Infecciones bacterianas piógenas.

n  Inflamaciones.

n  Cánceres.

n  Quemaduras.

n  Infarto al miocardio.

2.-                                              Leucopenias            Reducción del nº de leucocitos.

§  Aplasia medular.

§  Enfermedades virales.

§  Tuberculosis.

§  Fiebre tifoidea.

§  SIDA

§  Hepatitis.

§  Por drogas, como el fenilbutazona (antiinflamatorio).

Identificacion De Celulas Sanguineas Por Coloracion De Wright





IDENTIFICACION DE CELULAS SANGINEAS POR COLORACION DE WRIGHT

INTRODUCCION

Para saber más acerca de esta práctica le daré una pequeña introducción de lo que engloba esta.

La diferencia entre las células rojas y blancas es que Los glóbulos rojos llevan el oxígeno de la sangre y Los glóbulos blancos nos defienden de virus y bacterias.

Los leucocitos o glóbulos blancos son un conjunto de células sanguíneas cuya función principal es la defensa del organismo de sustancias ajenas o agentes infeccioso.
Los leucocitos son células móviles que se encuentran en la sangre, forman parte de los Elementos Figurados y forman lo que se llama la 'serie blanca'. Estas células, a diferencia de los hematíes, también llamados eritrocitos o glóbulos rojos, no contienen pigmentos, por lo que se les califica de glóbulos blancos. Son células con núcleo, mitocondrias y otros organelos celulares. Sus dos tipos principales son los 'leucocitos polimorfonucleares' y los 'linfocitos'. Los primeros tienen su núcleo con una apariencia de fragmentación. Los segundos presentan un núcleo bien unido e individualizado.
Su tamaño oscila entre los 20 y 8 um. Su tiempo de vida varía entre algunas horas hasta meses y años.



HEMOGRAMA



En medicina el hemograma o CSC (conteo sanguíneo completo) o biometría hemática es uno de los elementos diagnósticos básicos. Es un cuadro o fórmula sanguínea en el que se expresan el número, proporción y variaciones de los elementos sanguíneos.

Recoge:

1.  Número de hematíes, hematocrito, hemoglobina e índices eritrocitarios

2.  Recuento y fórmula leucocitaria

3.  Número de plaquetas

Valores normales


§  Hematíes (adultos)

§  Mujeres: 4,2 - 5,4 millones/mm³ (En unidades SI: 4,2 - 5,4 x10¹²/L)

§  Hombres: 4,6 - 6,2 millones/mm³ (En unidades SI: 4,6 - 6,2 x10¹²/L)

§  Hemoglobina (adultos)

§  Mujeres: 11,5 - 14,5 g/dL

§  Hombres: 13,5 - 16,0 g/dL

§  Hematocrito (adultos) Es la proporción entre los hematíes y el plasma sanguíneo

§  Mujeres: 37 - 42%

§  Hombres: 40 - 50%

§  Índices eritrocitarios (adultos)

§  Volumen corpuscular medio (VCM), se obtiene dividiendo el hematocrito entre el número de hematíes.

§  Valores normales: 78 - 100 fL

§  Hemoglobina corpuscular media (HCM), se obtiene dividiendo el valor de la hemoglobina entre el número de hematíes

§  Valores normales: 27 - 32 pG

§  Concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM), se obtiene dividiendo el valor de la hemoglobina entre el hematocrito

§  Valores normales: 30 - 35 g/dL

§  Leucocitos:

§  Valores normales: 4,5 - 10,5 mil/mm³ (En unidades SI: 4,5 - 10,5 x109/L).

§  Plaquetas:

§  Valores normales: 150.000 - 400.000 /mm³ (En unidades SI: 150 - 400 x 109/L).

§  Reticulocitos:

§  Valores normales: 0,5-1,5 % del valor de los hematíes (En unidades SI: 29 - 87 x109/L).

§  Fórmula leucocitaria: consiste en la diferenciación de los distintos tipos de leucocitos de la sangre mediante su observación al microscopio trás una tinción o mediante diferencicación a través de un contador hematólogico capaz de diferenciar las poblaciones leucocitarias

§   

§  Se diferencian los siguientes tipos celulares básicos: polimorfonucleares (de los cuales los neutrófilos  segmentados constituyen el 45-75%, eosinófilos 0-3% y basófilos 0-2%), linfocitos (15-45%) y monocitos (5-10%)

Actualmente se mide tambien: ■Plaquetocrito: Porcentaje del volumen de plaquetas sobre el volumen total de sangre. Es un dato de poco valor. (.100-.500 %) ■El volumen plaquetar medio (VPM ó MVP): la media del volumen de las plaquetas. (6.5-11.0 um3) ■Distribución de volumen (PDW): Mide si existen grandes diferencias de tamaño entre unas plaquetas y otras. (10.0-18.0 %)